האם ניתן לעשות שימוש חוזר בצינורות צנטריפוגות אולטרה סינון?הנה התשובה

שפופרת צנטריפוגה היא שפופרת פשוטה שיכולה לעמוד במהירות סיבוב ולחץ גבוהים, כגון הפרדת כמה דגימות והפרדת משקעי סופרנטנט.לשפופרת הצנטריפוגה אולטרה-פילטרציה יש שני חלקים הדומים לצינור הפנימי ולצינור החיצוני.הצינור הפנימי הוא קרום בעל משקל מולקולרי מסוים.במהלך צנטריפוגה מהירה, אלה עם משקל מולקולרי קטן יותר ידלפו לתוך הצינור התחתון (כלומר הצינור החיצוני), ובעלי משקל מולקולרי גדול יותר ייכלכו בצינור העליון (כלומר הצינור הפנימי).זהו העיקרון של סינון אולטרה והוא משמש לעתים קרובות לריכוז דגימות.

ניתן להשתמש בצינורות צנטריפוגות אולטרה סינון בדרך כלל ללא טיפול מקדים, אך לעיבוד דגימות חלבון, במיוחד עבור תמיסות חלבון מדוללות (<10 ug/ml), קצב ההתאוששות של הריכוז עם ממברנות אולטרה סינון לרוב אינו כמותי.למרות שחומרי PES ממזערים ספיחה לא ספציפית, לחלק מהחלבונים, במיוחד כשהם מדוללים, עלולות להיות בעיות.מידת הקישור הלא ספציפי משתנה בהתאם למבנה של חלבונים בודדים.חלבונים המכילים תחומים טעונים או הידרופוביים נוטים יותר להיקשר באופן בלתי הפיך למשטחים שונים.טיפול מקדים של פסיבציה על פני צינור הצנטריפוגה אולטרה-פילטרציה יכול להפחית את אובדן ספיחת החלבון על פני הממברנה.ברוב המקרים, טיפול מקדים בעמודה לפני ריכוז תמיסת החלבון המדוללת יכול לשפר את קצב ההתאוששות, מכיוון שהתמיסה יכולה למלא את אתרי ספיחת החלבון הריקים החשופים על הממברנה ועל פני השטח.שיטת הפסיבציה היא להשרות מראש את העמוד עם נפח גבוה יותר של תמיסת פסיבציה למשך יותר משעה, לשטוף את העמוד ביסודיות במים מזוקקים, ולאחר מכן לצנטריפוגה אותו פעם אחת עם מים מזוקקים כדי להסיר לחלוטין את תמיסת הפסיבציה שעלולה להישאר על הסרט. .היזהר לא לתת לסרט להתייבש לאחר הפסיבציה.אם אתה רוצה להשתמש בו מאוחר יותר, אתה צריך להוסיף מים מזוקקים סטריליים כדי לשמור על לחות הסרט.

בדרך כלל לא ניתן לעקר צינורות צנטריפוגות אולטרה-פילטרציה ולעשות בהם שימוש חוזר.מכיוון שמחיר צינור בודד אינו זול, אנשים רבים מנסים לעשות בו שימוש חוזר - הניסיון הוא לנקות את פני הממברנה במים מזוקקים במשך פעמים רבות ולצנטריפוגה אותו פעם או פעמיים.את הצינור הקטן שניתן לצנטריפוגה לאחור אפשר לטבול במים מזוקקים ואז לצנטריפוגה לאחור למשך יותר פעמים, מה שיהיה טוב יותר.ניתן להשתמש בו עבור אותה דגימה שוב ושוב, וניתן להשרות אותו במים מזוקקים כאשר אינו בשימוש, אך יש למנוע זיהום חיידקי.אין לערבב דוגמאות שונות.יש אנשים שאומרים שהשרייה ב-20% אלכוהול ו-1n NaOH (נתרן הידרוקסיד) יכולה למנוע צמיחה של חיידקים ולמנוע ייבוש.כל עוד קרום הסינון האולטרה פולש למים, לא ניתן לתת לו להתייבש.עם זאת, אחרים אומרים שזה יהרוס את מבנה הממברנה.בכל מקרה, יצרנים בדרך כלל אינם תומכים בשימוש חוזר.שימוש חוזר יחסום את גודל הנקבוביות של קרום המסנן, ואף יגרום לדליפת נוזלים, שתשפיע על תוצאות הניסוי.