באנר עם כותרת אחת

כיצד להשתמש בצינור שימור ההקפאה בצורה מדעית ונכונה

כיצד להשתמש בצינור שימור ההקפאה בצורה מדעית ונכונה

103

השימוש בצינור ההקפאה הוא מדע, טרילוגיה לא פשוטה כמו פתיחת מיכל החנקן הנוזלי, הכנסתו לצינור ההקפאה וסגירת מיכל החנקן הנוזלי.שימוש מדעי ונכון בצינורות שימור הקפאה יכול למנוע אובדן של דגימות ולהגן על בטיחות הבודקים.

השימוש בצינור ההקפאה הוא מדע, טרילוגיה לא פשוטה כמו פתיחת מיכל החנקן הנוזלי, הכנסתו לצינור ההקפאה וסגירת מיכל החנקן הנוזלי.שימוש מדעי ונכון בצינורות שימור הקפאה יכול למנוע אובדן של דגימות ולהגן על בטיחות הבודקים.

צינור הקפאה: שלבי הקפאה
שטפו את התאים בתמיסת PBS שחוממת מראש, מוצצים את התמיסה ומכסים את התאים בתמיסה המכילה טריפסין ו-EDTA (די בשכבה נוזלית דקה, ויש לקבוע את ריכוז הטריפסין וה-EDTA בהתאם לקו התא).

דגירה על תאים ב-37 ℃ למשך 3-5 דקות.

לאחר ניתוק התאים מלמטה, הדגירה מופסקת, מתווסף המדיום המכיל סרום, ותולים בעדינות בעזרת פיפטה.

צנטריפו את השעיית התא (500 xg, 5 דקות) והשעיה מחדש עם המדיום המכיל סרום.

 

ספירת תאים.
צנטריפו את השעיית התאים (500 xg, 5 דקות), הסר את הסופרנטנט והשעיית התאים מחדש עם מדיום המכיל סרום בנפח מתאים.

ערבבו תאים ותמיסת שימור הקפאה (בינוני 60%, 20% סרום בקר עוברי, 20% DMSO) ביחס נפח של 1:1, ולאחר מכן העבירו אותם לשפופרת Cryo STM.הצפיפות של תאים קפואים היא 1-5 × 106 חתיכות/מ"ל.

מומלץ להתקרר בשפופרת STM המכילה תאים קריו-שימור בקצב של − 1 K/min, וניתן להניח את צינור השמירה בהקפאה במיכל המכיל איזופרפנול ב- − 70 ℃.אם Cryo STM צינור שימור הקפאה מאחסן דגימות אחרות, שניתן למקם ישירות ב--20 ℃, −70 ℃ או בשלב הגז של חנקן נוזלי.כדי להבטיח שהדגימה מוקפאת באופן אחיד, 4 מ"ל ו-5 מ"ל Cryo יש להכניס את צינור השמירה להקפאה sTM במקרר ב-20 ℃ למשך הלילה, ולאחר מכן להעביר לשלב הגז של −70 ℃ או חנקן נוזלי.

לאחר מכן העבירו את השפופרת Cryo.sTM למיכל חנקן נוזלי.על מנת להימנע מזיהום (כגון מיקופלזמה) ושיקולי בטיחות, נא למקם את צינור השמירה של Cryo.sTM בשלב הגז של חנקן נוזלי, לא בשלב הנוזלי.

כיצד להשתמש בצינור שימור ההקפאה בצורה מדעית ונכונה?החברה שלנו מורכבת מאנשי מקצוע עם רקע בתעשייה וניסיון עשיר בשוק כדי לספק מוצרים לתחום מחקר מדעי החיים ושירותים לחוקרים מדעיים.זה לא רק יכול לענות על הדרישות המיוחדות של לקוחות מו"פ על סוגי מוצרים ואריזות, אלא גם לענות על הצרכים המקיפים של מפעלי ייצור בכל השלבים מקנה מידה קטן, בקנה מידה בינוני ועד לייצור בקנה מידה גדול.


זמן פרסום: 25 בנובמבר 2022